Доступные параметры:
SKU | Единица | ||
---|---|---|---|
![]() | RT35-020 | 2000 U ( 40U/μl ) | Спроси предложение |
![]() | RT35-100 | 10 000 U ( 40U/μl ) | Спроси предложение |
Ингибитор РНКаз RIBOPROTECT Hu представляет собой рекомбинантный человеческий плацентарный белок с молекулярной массой 50 кДа, выраженный в Escherichia coli. Он ингибирует активность рибонуклеаз (РНКаз) обычных эукариотических ферментов, таких как РНКаза A, РНКаза B, РНКаза C, за счет нековалентного связывания в отношении 1:1. RIBOPROTECT Hu предназначен для использования в областях применения, в которых присутствие РНКаз может быть сопряжено с риском в отношении качества РНК и результатов эксперимента, например, при выделении РНК, синтезе кДНК, ОТ-ПЦР, транскрипции и переносе in vitro или приготовлении моноклональных антител без РНКаз. RIBOPROTECT Hu не проявляет активности в отношении РНКазы 1, РНКазы Т1, РНКазы Т2, нуклеазы S1 и РНКазы H. Он совместим с ДНК-полимеразами и обратными транскриптазами AMV (вирус миелобластоза птиц) или M-MuLV (вирус мышиного лейкоза Молони).
Характеристики и преимущества
- Полностью ингибирует активность РНКаз А, B и C
- Нет влияния на активность полимераз или обратных транскриптаз
- Не подвержен активности ДНКаз и РНКаз
- Сохраняет полную стабильность при температуре 37 °С в течение не менее 4 недель
- Сохраняет стабильность до температуры 58 °C и при минимальном диапазоне концентраций ДТТ 0,5 – 1 ммоль
- Активен при разнообразных условиях реакции и в различных буферах
- Активен при широком диапазоне pH (pH 5,5 – 9,0)
- Совместим с обратной транскриптазой TRANSCRIPTME (каталожный номер RT32)
Области применения
- Выделение и очистка РНК
- Синтез кДНК, ОТ-ПЦР, ОТ-колПЦР
- Транскрипция и перенос in vitro
- Приготовление моноклональных антител без РНКаз
Определение единицы
Одна единица определяется как количество фермента, необходимое для 50%-ного ингибирования активности 5 нг РНКазы.
RIBOPROTECT Hu RNase Inhibitor — Troubleshooting
Применение
- Оптимальная конечная концентрация RIBOPROTECT Hu в реакции зависит от уровня загрязнения РНКазами, времени инкубации и соединений, присутствующих в реакционной смеси. Она попадает в диапазон 1 – 2 ед./мкл.
- Для стандартной реакции обратной транскрипции используйте 1 мкл (40 ед.) RIBOPROTECT Hu для получения конечного объема образца 20 мкл.
- Для достижения оптимальной активности RIBOPROTECT Hu важно, чтобы конечная концентрация ДТТ составляла 0,5 – 1 ммоль.
- Во время сборки реакции RIBOPROTECT Hu следует добавлять перед другими компонентами, являющимися возможными источниками загрязнения РНКазами.
- Использование RIBOPROTECT Hu не исключает обработки РНКазы H после усиления первой цепи кДНК.
Буфер для хранения
20 ммоль HEPES-KOH (рН 7,6); 50 ммоль КCl; 8 ммоль восстановителя; 50% (об./об.) глицерина
Условия хранения
Хранить при температуре -20 °C в морозильной камере без цикла размораживания.
Контроль качества
Отсутствие активности эндонуклеаз, экзонуклеаз, РНКаз и латентных РНКаз было подтверждено с помощью соответствующих процедур. Чистота составляет >90%, судя по SDS-полиакриламидным гелям.