Zestaw TRANSCRIPTME RNA zawiera wszystkie niezbędne składniki do przeprowadzenia syntezy pierwszej nici cDNA na matrycy mRNA lub całkowitego RNA. Uzyskany jednoniciowy cDNA nadaje się do stosowania w kolejnych etapach reakcji RT-PCR i/lub RT-QPCR.

Zestaw TRANSCRIPTME RNA został opracowany w celu zapewnienia wysokiej wydajności syntezy cDNA oraz zwiększenia czułości reakcji RT-QPCR. Pozwala na syntezę cDNA w zakresie ilości 10 pg-2,5 µg matrycowego RNA.

W skład zestawu wchodzi TRANSCRIPTME Enzyme Mix zawierający rekombinowaną termostabilną odwrotną transkryptazę M-MuLV (bez aktywności RNazy H) oraz inhibitor RNaz; ponadto zoptymalizowany bufor reakcyjny zawierający mieszaninę starterów oligo(dT)18 i random heksamerów X6, jony MgCl2 oraz mieszaninę dNTPs. Odwrotna transkryptaza TRANSCRIPTME charakteryzuje się podwyższoną termostabilnością, co umożliwia prowadzenie reakcji w wyższej temperaturze (optimum aktywności w temp. 50°C). Dzięki temu zwiększona zostaje wydajność i specyficzność transkrypcji regionów RNA z dużą zawartością par GC i/lub struktur drugorzędowych. Enzym nie posiada aktywności RNazy H i 3’-5’ egzonukleazy, umożliwiając tworzenie produktów cDNA o długości powyżej 10 kb.

Zastosowanie rekombinowanego inhibitora RNaz zabezpiecza matrycowe RNA przed degradacją. Do zestawu dołączona jest również RNaza H, która służy do specyficznej degradacji RNA w hybrydach RNA: cDNA tworzonych po syntezie pierwszej nici cDNA. Ten opcjonalny etap może znacznie poprawić czułość reakcji RT-QPCR, poprzez zwiększenie dostępności miejsc wiązania się starterów do matrycy cDNA w reakcji PCR. Trawienie RNazą H jest zalecane w przypadku wysokich stężeń wyjściowego matrycowego RNA, a także układów PCR wrażliwych na obecność pozostałości RNA.